紫外可見分光光度計是根據(jù)物質(zhì)分子對波長為200~760nm的電磁波的吸收特性所建立起來的一種定性、定量和結(jié)構(gòu)分析儀器。操作簡單、準(zhǔn)確度高、重現(xiàn)性好。波長長的光線能量小,波長短的光線能量大。
紫外可見分光光度計測量是關(guān)于物質(zhì)分子對不同波長和特定波長處的輻射吸收程度的測量。物質(zhì)的吸收光譜本質(zhì)上就是物質(zhì)中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波長的光能量,相應(yīng)地發(fā)生了分子振動能級躍遷和電子能級躍遷的結(jié)果。由于各種物質(zhì)具有不同的分子、原子和不同的分子空間結(jié)構(gòu),其吸收光能量的情況也就不會相同,因此,每種物質(zhì)就有其*的、固定的吸收光譜曲線,可根據(jù)吸收光譜上的某些特征波長處的吸光度的高低判別或測定該物質(zhì)的含量,這就是分光光度定性和定量分析的基礎(chǔ)。分光光度分析就是根據(jù)物質(zhì)的吸收光譜研究物質(zhì)的成分、結(jié)構(gòu)和物質(zhì)間相互作用的有效手段。
基本結(jié)構(gòu):
紫外可見分光光度計主要由電光系統(tǒng)、光學(xué)系統(tǒng)、光電系統(tǒng)、電子系統(tǒng)和數(shù)據(jù)處理、輸出打印系統(tǒng)等幾個部分組成。
1、電光系統(tǒng):主要由氘燈、鎢燈和相應(yīng)的電源組成。電光系統(tǒng)對整機的穩(wěn)定性有很大的影響,是儀器不穩(wěn)定的主要原因之一。
2、光學(xué)系統(tǒng):包括外光路系統(tǒng)(轉(zhuǎn)向平面鏡、聚光鏡)、單色器兩個主要部分;其中,外光路和單色器各有很多類型。單色器是紫外可見分光光度計雜散光的主要來源,是整機使用時,主要分析誤差的來源之一。
3、光電系統(tǒng):是將光信號變?yōu)殡娦盘柕年P(guān)鍵部件,直接影響儀器的靈敏度和適用范圍;一般有光電管、光電倍增管、硅光電池、二極管陣列等。
4、電子系統(tǒng):主要由放大器、A/D變換器等組成;其中的放大器,也是影響整機靈敏度、穩(wěn)定性的主要部件。它又是儀器噪聲的主要來源部件,直接影響本產(chǎn)品的分析誤差。
5、數(shù)據(jù)處理、輸出打印系統(tǒng):是決定整機的自動化程度的關(guān)鍵部件;特別是軟件部分,直接影響本產(chǎn)品的質(zhì)量。
使用注意事項:
1、使用紫外可見分光光度計的人員,一般來說,一定要詳細(xì)閱讀儀器安全操作手冊,否則嚴(yán)禁操作儀器。準(zhǔn)備操作儀器前,需要先查看一下指針儀器在斷電的情況下,表面指針是否指向零刻度。如若不是,理應(yīng)先調(diào)零然后才能連接電源。在使用的過程中,操作員應(yīng)該盡量避免對鏡燈的觸碰,放大器使用過后,一定需要把檔位歸置到零。
2、除此之外,在操作時,操作人員需要留意一下機器的干燥劑,因為這是非常重要的。通常情況下,干燥劑有效時,儀器的工作是不會出現(xiàn)任何問題的??墒钱?dāng)干燥劑失效之后,所出現(xiàn)的問題是非常嚴(yán)重的。除了儀器上面顯數(shù)不準(zhǔn)之外,很容易使反射鏡變得污穢,從而使得光線率不準(zhǔn)確。因此,日常使用儀器時,一定要注意干燥是否有效。當(dāng)發(fā)現(xiàn)失效后,要及時進(jìn)行更換。
3、產(chǎn)品在開機前將樣品室內(nèi)的干燥劑取出,儀器自檢過程中禁止打開樣品室蓋。
4、比色皿內(nèi)溶液以皿高的2/3~4/5為宜,不可過滿以防液體溢出腐蝕儀器。測定時應(yīng)保持比色皿清潔,池壁上液滴應(yīng)用擦鏡紙擦干,切勿用手捏透光面。測定紫外波長時,需選用石英比色皿。
5、實驗結(jié)束后將比色皿中的溶液倒盡,然后用蒸餾水或有機溶劑沖洗比色皿至干凈,倒立晾干。關(guān)電源將干燥劑放入樣品室內(nèi),蓋上防塵罩,做好使用登記。